旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮多肽與蛋白質(zhì)冷凍干燥常見濃縮法?
2024-03-07 11:25:14 點擊量:
多肽和蛋白質(zhì)是自然界中四種基本分類的大分子之一。人們經(jīng)常研究它們作為潛在的治療藥物。在合成蛋白質(zhì)后,分離蛋白質(zhì)是一個關(guān)鍵步驟。為了確保高效的分離步驟,了解兩種常用干燥技術(shù)——旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和冷凍干燥之間的差異非常重要。
蛋白質(zhì)在幾乎所有細胞的基本過程中起著重要作用,其中大部分信息都被編碼在核酸中,并由蛋白質(zhì)控制。蛋白質(zhì)由稱為氨基酸的組成單元構(gòu)成。在溶液中,蛋白質(zhì)形成高度有序的三維結(jié)構(gòu),這與它們的生物功能密切相關(guān)。肽是蛋白質(zhì)的較小版本,因為它們包含較少的氨基酸。盡管肽的三維結(jié)構(gòu)比蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)簡單,但其生物重要性并不少于蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì)和多肽在身體中負責(zé)各種生命必需功能和過程的重要分子,包括信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、心率調(diào)節(jié)、食物攝入和生長。它們在生物醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)、生物工程、藥物發(fā)現(xiàn)、藥物傳遞、化妝品和營養(yǎng)等領(lǐng)域中也被廣泛應(yīng)用。例如胰島素或阿斯巴甜等分子是蛋白質(zhì)和多肽在藥物和食品應(yīng)用中被使用的眾所周知的例子。
在藥物開發(fā)中,蛋白質(zhì)和多肽通常被認為是對抗各種疾病的有吸引力的治療藥物。在生物醫(yī)學(xué)或生物化學(xué)研究中,這些生物分子可以用作定量研究的參考物質(zhì)、細胞培養(yǎng)的生長因子和細胞因子、生化分析中的活性酶、分子移動的載體蛋白質(zhì)、阻斷通路的抑制劑或與抗體配對使用的抗原。

通過化學(xué)合成、利用重組微生物或無細胞表達系統(tǒng)進行制造,以及通過從其自然環(huán)境中提取,可以實現(xiàn)蛋白質(zhì)和多肽的制造。最適合的制造策略在很大程度上取決于所需分子的大小和化學(xué)特性。
多肽與蛋白類樣品的常見濃縮法:制作多肽或蛋白質(zhì)需要進一步處理以達到高純度,進行下游分析。處理步驟包括純化、濃縮和制劑,濃縮步驟可以通過幾種技術(shù)來完成,如噴霧干燥、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、并行蒸發(fā)和凍干。
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在濃縮和干燥時間上有非常明顯的優(yōu)勢,常規(guī)實驗量的反應(yīng)液(1L以內(nèi)),在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上可以在1小時以內(nèi)處理完畢。除此之外,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀免去了冷凍干燥的預(yù)凍步驟,可直接上機處理,這進一步加快了處理效率。
相對于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,冷凍干燥機在應(yīng)用面上會顯得狹窄很多。但其干燥樣品的程度,特別是針對含水量較高的樣品,冷凍干燥具有絕對的優(yōu)勢,這有助于后續(xù)的處理。因此在針對多肽和蛋白類化合物時,我們可以根據(jù)不同的步驟采取多種干燥手段。在純化分離前,往往有大量的液體樣品需要濃縮,才能保證樣品不在分離柱內(nèi)擴散,獲得較好的峰型,這時我們可以采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀來處理。而在純化分離完畢后,我們會獲得高純度的少量液體樣品,此時我們就可以采用冷凍干燥來處理。
蛋白質(zhì)在幾乎所有細胞的基本過程中起著重要作用,其中大部分信息都被編碼在核酸中,并由蛋白質(zhì)控制。蛋白質(zhì)由稱為氨基酸的組成單元構(gòu)成。在溶液中,蛋白質(zhì)形成高度有序的三維結(jié)構(gòu),這與它們的生物功能密切相關(guān)。肽是蛋白質(zhì)的較小版本,因為它們包含較少的氨基酸。盡管肽的三維結(jié)構(gòu)比蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)簡單,但其生物重要性并不少于蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì)和多肽在身體中負責(zé)各種生命必需功能和過程的重要分子,包括信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、心率調(diào)節(jié)、食物攝入和生長。它們在生物醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)、生物工程、藥物發(fā)現(xiàn)、藥物傳遞、化妝品和營養(yǎng)等領(lǐng)域中也被廣泛應(yīng)用。例如胰島素或阿斯巴甜等分子是蛋白質(zhì)和多肽在藥物和食品應(yīng)用中被使用的眾所周知的例子。
在藥物開發(fā)中,蛋白質(zhì)和多肽通常被認為是對抗各種疾病的有吸引力的治療藥物。在生物醫(yī)學(xué)或生物化學(xué)研究中,這些生物分子可以用作定量研究的參考物質(zhì)、細胞培養(yǎng)的生長因子和細胞因子、生化分析中的活性酶、分子移動的載體蛋白質(zhì)、阻斷通路的抑制劑或與抗體配對使用的抗原。

通過化學(xué)合成、利用重組微生物或無細胞表達系統(tǒng)進行制造,以及通過從其自然環(huán)境中提取,可以實現(xiàn)蛋白質(zhì)和多肽的制造。最適合的制造策略在很大程度上取決于所需分子的大小和化學(xué)特性。
多肽與蛋白類樣品的常見濃縮法:制作多肽或蛋白質(zhì)需要進一步處理以達到高純度,進行下游分析。處理步驟包括純化、濃縮和制劑,濃縮步驟可以通過幾種技術(shù)來完成,如噴霧干燥、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、并行蒸發(fā)和凍干。
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在濃縮和干燥時間上有非常明顯的優(yōu)勢,常規(guī)實驗量的反應(yīng)液(1L以內(nèi)),在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上可以在1小時以內(nèi)處理完畢。除此之外,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀免去了冷凍干燥的預(yù)凍步驟,可直接上機處理,這進一步加快了處理效率。
相對于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,冷凍干燥機在應(yīng)用面上會顯得狹窄很多。但其干燥樣品的程度,特別是針對含水量較高的樣品,冷凍干燥具有絕對的優(yōu)勢,這有助于后續(xù)的處理。因此在針對多肽和蛋白類化合物時,我們可以根據(jù)不同的步驟采取多種干燥手段。在純化分離前,往往有大量的液體樣品需要濃縮,才能保證樣品不在分離柱內(nèi)擴散,獲得較好的峰型,這時我們可以采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀來處理。而在純化分離完畢后,我們會獲得高純度的少量液體樣品,此時我們就可以采用冷凍干燥來處理。